O enzimă este o proteină care catalizează (crește rata de) reacții chimice. Temperatura optimă a majorității enzimelor sau temperatura la care enzimele facilitează cel mai bine reacțiile este între 35 și 40 de grade Celsius. Creșterea temperaturii în această fereastră crește rata de reacție, deoarece excită moleculele și crește rata la care enzimele / reactanții se ciocnesc și reacționează pentru a face produs. Totuși, creșterea prea multă temperatură poate denatura enzima și o poate împiedica să funcționeze deloc.
Determinați temperatura optimă a enzimei prin încălzirea reacției prin cantități infinitezimale și luând probe mici de reacție, pentru a determina când apare rata maximă a produsului.
Selectați o metodă. Determinați modul în care veți măsura concentrația produsului în diferite puncte ale experimentului. De exemplu, puteți măsura concentrația multor produse folosind un spectrofotometru și calculând concentrația din absorbție sau măsurând fluorescența și calculând concentrația din fluorescență.
Configurează-ți experimentul. Puneți reactanții și enzima într-un recipient mic, cu un capac, cum ar fi un flacon de scintilație. Reacția va începe. Puneți flaconul de scintilație într-un pahar mai mare de apă la temperatura camerei. Așezați paharul pe o placă de încălzire. Plasați un termometru în interiorul paharului. Acest lucru vă permite să măsurați temperatura reacției în diferite puncte.
Ia o probă de 100 microlitri a reacției la temperatura camerei, aproximativ 25 de grade Celsius. Porniți placa de încălzire. La diferite temperaturi cuprinse între 30 și 40 de grade Celsius (30,5, 31, 31,5, etc.), luați 100 de probe de microlitru din reacția dvs.
Determinați concentrația produsului dvs. la fiecare temperatură. Când temperatura crește peste 40 de grade Celsius, veți observa o scădere a vitezei la care substratul este transformat în produs, deoarece enzima este denaturată. Punctul în care produsul este produs la viteza maximă este punctul în care temperatura este optimă.