Conţinut
Deși nu pot fi văzute cu ochiul liber, bacteriile sunt peste tot. Ele există în alimente, sol, apă, suprafețe din casele noastre și în și pe corpul nostru. Bacteriile există în general în populații mixte. Izolarea unei bacterii specifice de alte specii bacteriene dintr-un eșantion dat permite microbiologilor să-i studieze structura și funcția, caracteristicile utilizate în identificarea sa. Microbiologii izolează frecvent bacteriile folosind una dintre mai multe tehnici de placă cu bandă.
Unelte
O buclă de inoculare este utilizată pentru a transfera microorganisme. Este format dintr-un fir nichrom sau platină cu o buclă mică, circulară pe un capăt. Celălalt capăt este drept și alunecă într-un mâner. Sunt disponibile și bucle de inoculare de plastic de unică folosință. Bacteriile pot fi izolate numai dacă cresc. Microbiologii cultivă bacteriile pentru izolarea plăcilor în dungi în vasele mici și rotunde petri umplute cu un mediu solid, numit agar. Agar imită mediul în care bacteriile cresc în mod natural. Plăcile pline de mediu sunt sterile și s-au adăpostit pentru a preveni creșterea organismelor nedorite. În timpul izolării plăcii cu bandă, bucla de inoculare este sterilizată în mod repetat în flacăra unui arzător Bunsen.
Principiu
Tehnica cu placă de bandă este cea mai populară metodă pentru izolarea bacteriilor specifice dintr-un eșantion care conține un amestec de microorganisme. Tehnica diluează în esență numărul de organisme și reduce densitatea acestora. Permite microbiologilor să distingă și să izoleze coloniile bacteriene individuale. O colonie este un grup vizibil de bacterii. Toate bacteriile dintr-o singură colonie provin din aceeași celulă bacteriană. În consecință, coloniile individuale sunt colonii „pure”. Colonia pură este transferată pe o altă placă pentru a produce o cultură pură formată dintr-un singur tip de bacterii.
Procedură
Când a fost făcută corect, izolarea plăcii cu strat subțiază un specimen și permite celulelor bacteriene individuale să se dezvolte în colonii izolate. Un microbiolog începe prin sterilizarea buclei de inoculare într-o flacără. Se răcește bucla atingând-o la agar, apoi se introduce bucla în probă și se întinde înainte și înapoi pentru a acoperi o secțiune a plăcii. Ea sterilizează bucla, o răcește și inoculează o a doua secțiune adiacentă a plăcii trăgând bucla prin prima secțiune de mai multe ori și acoperind a doua secțiune folosind o mișcare în zig-zag. Aceasta ridică un număr mic de bacterii din prima secțiune și le transferă în a doua secțiune. Numărul de repetări a acestei proceduri de bază depinde de metoda plăcii de bandă utilizate. În ciuda metodei, eșantionul original este utilizat pentru a inocula doar prima secțiune a plăcii.
Metoda placii cu bandă
Metodele cu placă de bandă variază în funcție de numărul de secțiuni de agar strecurate. Metoda T-Streak folosește trei secțiuni: jumătatea superioară și două secțiuni inferioare de dimensiuni egale. Inoculul inițial este plasat în jumătatea superioară a plăcii. Bacteriile sunt trase de la secțiunea de sus la una din secțiunile de jos, apoi de la acea secțiune de jos în cealaltă. În metoda cadranului, patru secțiuni de dimensiuni egale sunt strecurate. Metoda de spălare continuă implică de obicei inocularea jumătății superioare a plăcii, rotirea acesteia cu 180 de grade și inocularea celeilalte jumătăți ale plăcii fără a steriliza bucla sau a trage bacteriile din secțiunea anterioară.