Cum se calculează km

Posted on
Autor: Monica Porter
Data Creației: 20 Martie 2021
Data Actualizării: 17 Mai 2024
Anonim
How to calculate Km and Vmax values - Lineweaver Burk plot in Excel
Video: How to calculate Km and Vmax values - Lineweaver Burk plot in Excel

Conţinut

În reacțiile biologice, enzimele funcționează la fel ca catalizatorii, oferind căi alternative pentru apariția reacțiilor și grăbind procesul general. O enzimă funcționează în interiorul unui substrat și capacitatea sa de a crește viteza reacției depinde de cât de bine se leagă de substrat. Constanta Michaelis, notată de KM, este o măsură a afinității enzimei / substratului. O valoare mai mică indică o legare mai strânsă, ceea ce înseamnă că reacția își va atinge viteza maximă la o concentrație mai mică. KM are aceleași unități ca și concentrația de substrat și este egală cu concentrația de substrat atunci când viteza reacției este la jumătatea valorii sale maxime.

Trama Michaelis-Menten

Viteza unei reacții catalizate de enzimă este o funcție a concentrației de substrat. Pentru a obține un complot pentru o anumită reacție, cercetătorii pregătesc mai multe probe de substrat la diferite concentrații și înregistrează rata de formare a produsului pentru fiecare probă. O diagramă de viteză (V) vs. concentrație () produce o curbă care urcă rapid și se nivelează la viteza maximă, care este punctul în care enzima funcționează cât de repede poate. Aceasta se numește complot de saturație sau complot Michaelis-Menten.

Ecuația care definește complotul Michaelis-Menten este:

V = (Vmax ) ÷ (KM +, această ecuație se reduce la V = Vmax ÷ 2, deci KM este egală cu concentrația substratului atunci când viteza este jumătate din valoarea sa maximă. Acest lucru face teoretic posibil să citiți KM în afara graficului.

Trama Lineweaver-Burk

Deși este posibil să citiți KM dintr-un complot Michaelis-Menten, nu este ușor sau neapărat precis. O alternativă este reprezentarea reciprocă a ecuației Michaelis-Menten, care este (după ce toți termenii au fost rearanjați):

1 / V = ​​{KM/ (Vmax ×)} + (1 / Vmax)

Această ecuație are forma y = mx + b, unde

Aceasta este ecuația utilizată în mod normal pentru a determina KM. Pregătesc diferite concentrații de substrat (deoarece este o linie dreaptă, din punct de vedere tehnic nu au nevoie decât de două), desenează rezultatele și citesc KM direct în afara graficului.