Conţinut
- Vizualizare mai bună
- Identificare și clasificare
- Detectarea viabilității
- Identificarea structurilor celulare
Microbiologii studiază caracteristicile microorganismelor precum algele, protozoarele, bacteriile, ciupercile și virușii folosind un microscop. În timp ce unele organisme, cum ar fi protozoarele și celulele de drojdie, sunt ușor de observat folosind o montare umedă, celulele bacteriene necesită colorare. Oamenii de știință au dezvoltat mai multe metode precum colorația Gram, colorarea rapidă cu acid și colorarea fluorescentă pentru o mai bună vizualizare a celulelor bacteriene și a structurilor celulare. Folosind astfel de metode de colorare, este posibilă identificarea caracteristicilor structurale care ajută la clasificarea bacteriilor.
Vizualizare mai bună
Organismele bacteriene sunt atât de mici încât majoritatea sunt vizibile doar la un microscop cu o putere de mărire de 1000X. Cu toate acestea, simpla mărire a dimensiunii nu oferă un grad suficient de claritate, astfel încât bacteriile trebuie, prin urmare, să fie colorate înainte de observare pentru a oferi claritatea necesară vizualizării.
Identificare și clasificare
Colorarea bacteriilor pentru a distinge între tipurile de bacterii este cunoscută sub numele de colorare diferențială. Pata Gram este una dintre aceste pete diferențiale care face distincția între bacterii pe baza conținutului peretelui lor celular. În această metodă, celulele bacteriene reacționează cu o pată violet de cristal pentru a lua o culoare violetă. La adăugarea unui agent de colorare, unele celule bacteriene își pierd culoarea, în timp ce altele nu. La adăugarea petei de safranină, celulele decolorizate preiau pata pentru a deveni roșie, în timp ce celulele bacteriene care nu-și pierduseră culoarea rămân violete. Celulele bacteriene care preiau culoarea roșie se numesc organisme Gram negative și cele care nu iau culoarea sunt clasificate ca organisme Gram pozitive. Colorația Gram oferă o metodă rapidă pentru identificarea inițială a bacteriilor implicate în infecții. În mod similar, procedura de colorare rapidă cu acid ajută la identificarea specifică a organismelor aparținând clasei de bacterii numite Mycobacteria, cum ar fi Mycobacterium tuberculosis.
Detectarea viabilității
În epruvetele de cultură bacteriană, este adesea importantă detectarea prezenței celulelor bacteriene vii. Metodele de colorare, cum ar fi colorarea fluorescentă, ajută la identificarea dacă celulele de cultură sunt viabile sau nu. Bacteriile vii au capacitatea de a converti pata de 5-ciano-2,3-ditolil Tetrazolium Clorură (CTC) într-un colorant care prezintă o fluorescență roșie. Prin urmare, atunci când culturile colorate cu CTC emit o astfel de fluorescență, aceasta indică prezența bacteriilor viabile. Iodura de propiu este o pată care acționează numai asupra celulelor nevii care posedă membrane deteriorate și, prin urmare, este utilă în identificarea celulelor bacteriene moarte.
Identificarea structurilor celulare
Colorația oferă o metodă de vizualizare clară a mai multor structuri celulare. De exemplu, metoda de colorare Fuelgen permite identificarea nucleului din celulele bacteriene, în timp ce pata lui Albert este utilă în vizualizarea granulelor metachromatice. În mod similar, tehnica de impregnare a argintului permite identificarea spirochetelor. Flagelele sunt ușor de observat atunci când sunt pătate cu pata lui Ryu. Colorarea verde Malachite ajută la identificarea sporilor bacterieni.