Conţinut
HPLC oferă o metodă rapidă, automatizată și extrem de precisă pentru a identifica anumite componente chimice dintr-un eșantion, dar poate fi costisitoare, complexă și nu funcționează pentru toate probele. Laboratoarele medicale, medico-legale, de mediu și de fabricație folosesc tehnica de cuantificare și separare a substanțelor chimice dintr-un eșantion. HPLC are atât avantaje, cât și dezavantaje în comparație cu alte tehnici.
HPLC și tehnici similare
Ca și alte forme de cromatografie, HPLC permite separarea componentelor chimice prin utilizarea unei faze mobile și a unei faze staționare. Faza mobilă este lichidă, iar faza staționară este solidă. Deoarece componentele diferite se mișcă cu viteze diferite, se separă unele de altele. Tehnicile alternative includ electroforeza capilară, unde substanțele migrează prin soluții într-un câmp electric și alte metode cromatografice, cum ar fi extracția în faze solide, cromatografia de gaze și cromatografia în strat subțire.
Viteză, eficiență și precizie
În comparație cu alte tehnici cromatografice, cum ar fi TLC, HPLC este extrem de rapid și eficient. Folosește o pompă, mai degrabă decât o gravitate, pentru a forța un solvent lichid printr-un material adsorbant solid, cu diferite componente chimice care se separă în timp ce se deplasează cu viteze diferite. Procesul poate fi finalizat în aproximativ 10-30 de minute și oferă rezoluție înaltă. Este precis și foarte reproductibil. Deoarece este automatizat în mare parte, rulările HPLC de bază pot fi efectuate cu un antrenament minim.
Cost și complexitate
În ciuda avantajelor sale, HPLC poate fi costisitor, necesitând cantități mari de organice scumpe. Tehnici precum extracția în faze solide și electroforeza capilară pot fi mai ieftine și chiar mai rapide, în special pentru analize în conformitate cu bune practici de fabricație. Deși este relativ ușor să folosiți metodele HPLC existente, poate fi complex să rezolvați probleme sau să dezvoltați noi metode. Acest lucru se datorează în mare măsură gamei de module, coloane și faze mobile diferite.
Sensibilitate și rezoluție
În general, HPLC este versatil și extrem de precis când vine vorba de identificarea și cuantificarea componentelor chimice. Cu mai mulți pași implicați, precizia HPLC este în mare măsură redusă procesului automatizat și, prin urmare, foarte reproductibil. HPLC are o sensibilitate scăzută pentru anumiți compuși, iar unii nu pot fi detectați, deoarece sunt adsorbiți ireversibil. Substanțele volatile sunt mai bine separate prin cromatografie de gaz.