Conţinut
Oamenii de știință și cercetătorii studiază creșterea bacteriilor prin pregătirea culturilor într-un laborator. Vasele Petri care conțin agar de nutrienți cultivă culturi bacteriene dintr-o singură alunecare sau inoculare. Studenții pot pregăti agar de nutrienți acasă folosind consumabile de la alimentație sau magazine alimentare de sănătate pentru un proiect de târg științific. Aparatele de bucătărie convenționale și articole de bucătărie de bază oferă instrumentele pentru a pregăti un mediu de cultură steril care poate fi distribuit în vasele petri. Urmarea tehnicilor sterile prin încălzirea materialelor și păstrarea suprafețelor curate și uscate va spori rezultatele prin prevenirea contaminării mucegaiului și a particulelor.
Puneți un filtru de cafea într-o strecurătoare și agățați filtrul deasupra deschiderii vasului limpede.
Turnați încet bulionul în filtru, asigurându-vă că bulionul nu se revarsă din părțile laterale ale filtrului. Dacă filtrul se înfundă cu particule, îndepărtați filtrul folosit, înlocuiți cu un filtru curat și continuați să turnați bulionul.
Scoateți filtrul și filtrul din partea de sus a bolului și observați dacă bulionul apare limpede (adică nu există particule suspendate în lichid). Dacă particulele plutesc în lichid, repetați pașii 1 și 2 folosind un al doilea bol limpede și un filtru de cafea proaspăt.
Puneți vasul pe aragaz și turnați bulionul limpede în oală.
Adăugați 16 uncii de apă distilată în oala care conține bulionul.
Porniți soba și reglați căldura la medie-mică. Încălziți bulionul la o temperatura de fierbere (adică, bule mici apar lângă partea vasului).
Adăugați 1 linguriță de pulbere de agar-agar pe bulionul de fierbere (aproximativ 2,5 grame) și agitați amestecul până la dizolvarea pulberii. Asigurați-vă că agitați pulberea pentru a se dizolva și împiedicați gelatina să se scufunde până în fundul vasului (unde se poate arde).
Repetați etapa 7 până când toată pulberea de agar-agar a fost dizolvată în bulion.
Continuați să agitați bulionul aproximativ 1 minut pentru a vă asigura că toată pulberea este dizolvată complet.
Opriți aragazul, așezați capacul pe oală și lăsați lichidul să se răcească cel puțin 15 minute.
Aranjați vasele sterile petri într-un rând pentru o asamblare ușoară, dar nu îndepărtați capacele.Dacă doriți, așezați o copertină pentru a ține vasul cald. Dacă folosești căni cu cremă în loc de petri, sterilizați cupele cu cremă plasând cupe și capace inversate (cu susul în jos) pe o foaie de hârtie acoperită cu folie și coaceți la cuptor cel puțin o oră la 375 grade Fahrenheit. Asigurați-vă că cupele și capacele sterilizate sunt complet răcite înainte de utilizare.
Atingeți cu atenție exteriorul oalei pentru a verifica dacă este cald la atingere și așezați oala pe chiuvetă. Dacă oala este prea caldă pentru a atinge, așteptați cel puțin 10 minute pentru a lăsa vasul să se răcească.
Scoateți capacul și puneți deoparte. Puneți coșul în oală.
Scoateți capacul dintr-o farfurie Petri și distribuiți bulionul de nutrienți pentru a umple vasul la jumătate. Acoperiți vasul imediat cu capacul său.
Repetați pasul 14 pentru fiecare bucată petri.
Lăsați bulionul de nutrienți să se solidifice în vasele Petri timp de cel puțin 1 oră, nedisturbat.
Agitați ușor vasele petri una peste alta pentru a verifica dacă bulionul de nutrienți s-a solidificat complet. Dacă bulionul nu este complet gelificat, așteptați încă 20 de minute înainte de a verifica din nou.
Acoperiți o masă sau o suprafață plană cu un sul de prosoape de hârtie pentru a crea o zonă de lucru sterilă. Îndepărtați o foaie de prosop de hârtie și pliați-o de patru ori pentru a crea o pană groasă, dreptunghiulară. Setați această placă pe un capăt al zonei de lucru.
Transferați o farfurie Petri în zona de lucru sterilă și îndepărtați capacul. Întoarceți cu grijă vasul și așezați un capăt pe partea laterală a paharului pliat, astfel încât să se întoarcă și să fie ușor înclinat (cu un ușor decalaj de covorul de hârtie).
Întoarceți capacul și așezați-l deasupra vasului Petri pe suprafața de lucru sterilă. Dacă picăturile de apă apar pe capac, agitați ușor această umiditate înainte de a pune pe suprafața acoperită, dar nu atingeți interiorul capacului.
Repetați pașii 19 și 20 pentru fiecare farfurie Petri, poziționând o parte a vasului răsturnat pe partea anterioară a vasului anterior, mai degrabă decât covorul de hârtie. Vasele vor apărea ca un set eșalonat, cu goluri pe o parte, astfel încât excesul de umiditate se poate evapora.
Priviți vasele petri inversate pentru a verifica dacă umiditatea de pe laturile plăcilor a evaporat. După ce toată umezeala s-a curățat, rotiți plăcile pe partea dreaptă în sus și acoperiți imediat cu capacele pentru utilizare.
Inoculați agarul de nutrienți de pe placă ștergând un tampon care conține cultura dorită pe suprafața de agar nutritiv înainte de acoperirea cu capac. Întoarceți vasul Petri astfel încât solidul să fie deasupra. Depozitați vasul petri inoculat cu solidul deasupra pentru cultivare și capacul pe partea de jos pentru a prinde orice umiditate, particule libere sau creștere.